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Candidoses : diagnostic biologique

Candidoses : diagnostic biologiqueMemoBio©

 

A)   Diagnostic mycologique

1) Prélèvement

- Muqueuses et lésions suintantes : prélèvement avec un écouvillon stérile humidifié
- Lésions squameuses : gratter par un vaccinostyle 
- Ongles : racler sous le bourrelet du péri-onyxis
- Liquides pathogènes et biopsies : acheminer dans un flacon stérile sans milieu de transport particulier.

2) Examen direct

Il doit être réalisé assez rapidement après le prélèvement (les levures proliférent à température ambiante)

- Eclaircissement : réalisé avec de la potasse (KOH) : uniquement pour les squames et les ongles
- Coloration : l’observation au microscope se fait soit directement à l’état frais entre lame et lamelle soit après coloration : bleu lactique, gram, MGG, bleu de méthylène, Gomori-Grocott …
- Observations : les levures peuvent apparaître sous forme de blastospore (forme ovale de 2-4µm +/- bourgeonnement), de pseudomycélium ou de mycélium

3) Culture

- Milieu de Sabouraud + antibiotique (gentamicine, chloramphénicol pour inhiber les contaminations bactériennes).
Candida albicans
pousse sur milieu Sabouraud chloramphénicol actidione (mais d’autres espèces de Candida sont inhibées par l’actidione).
- Milieu chromogène : permet d’identifier C. albicans directement à la couleur de la colonie (pour les autres levures, des examens complémentaires sont nécessaires pour identifier l’espèce en cause)
- Milieu pauvre : RAT, PCB (pomme de terre, carotte, bile) : permettent d’observer les formes pseudomycélium

Incubation à 25-30°C (éventuellement 37°C pour les prélèvements profonds)

C. albicans : développement en 24-48H de colonies d’1-2mm de diamètre, crémeuses, blanchâtre

4) Autres tests d’identification

- Test de blastèse : étude de la filamentation
- Recherche de chlamydospores
- Détection antigènique : technique d’agglutination (particules de latex sensibilisée par de anticorps monoclonaux

B)  Sérologie

Utilisé pour le diagnostic ou la surveillance des candidoses profondes.

   - détection des Ac : il faut tenir compte du titre, des arcs de précipitation …
   - détection des Ag circulants : détection d’Ag mannanes (peu être intéressant chez l’immunodéprimé où la détection d’Ac peut être difficile d’interprétation)

C)  PCR

D)      Anti-fongigramme

Un antifongigramme peut être réalisé dans le cadre d'un échec thérapeutique.
Des CMI peuvent être mesurées par la technique des E-test