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preparation concours internat 2011 - 2012
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Coloration de Ziehl-Neelsen

Réalisation

     - Couvrir la lame par de la fuchsine phéniquée
     - Chauffer 3 fois 10 minutes jusqu'à l'émission de vapeurs (rajouter du colorant s'il s'évapore trop)
     - Rincer à l’eau
     - Couvrir la lame d'acide nitrique dilué au 1/3, laisser agir 45 secondes
     - Rincer à l’eau
     - Couvrir la lame d'alcool éthylique à 95° et laisser agir 5 minutes
     - Rincer à l’eau
     - Couvrir la lame de bleu de méthylène et laisser agir 2 minutes
     - Rincer à l’eau
     - Laisser sécher et lire à l’immersion (objectif 100)

Variantes

Coloration de Ziehl-Neelsen à froid : les lames sont immergées pendant au moins 3H dans la solution de fuchsine.

On peut utiliser de l'acide sulfurique dilué au 1/4 au lieu de l'acide nitrique

On peut remplacer la double décoloration par une décoloration unique avec un mélange acide-alcool pendant 2 minutes

On peut remplacer les 3 dernières étapes (décoloration et contre-coloration) par une étape unique en utilisant du réactif d'Armand (mélange acide + alcool + bleu de méthylène).

Interprétation

Cette coloration est utilisée prinipalement pour la mise en évidence de mycobactéries (apparaissent en rouge sur fond bleu)