- Couvrir la lame par de la fuchsine phéniquée
- Chauffer 3 fois 10 minutes jusqu'à l'émission de vapeurs (rajouter du colorant s'il s'évapore trop)
- Rincer à l’eau
- Couvrir la lame d'acide nitrique dilué au 1/3, laisser agir 45 secondes
- Rincer à l’eau
- Couvrir la lame d'alcool éthylique à 95° et laisser agir 5 minutes
- Rincer à l’eau
- Couvrir la lame de bleu de méthylène et laisser agir 2 minutes
- Rincer à l’eau
- Laisser sécher et lire à l’immersion (objectif 100)
Coloration de Ziehl-Neelsen à froid : les lames sont immergées pendant au moins 3H dans la solution de fuchsine.
On peut utiliser de l'acide sulfurique dilué au 1/4 au lieu de l'acide nitrique
On peut remplacer la double décoloration par une décoloration unique avec un mélange acide-alcool pendant 2 minutes
On peut remplacer les 3 dernières étapes (décoloration et contre-coloration) par une étape unique en utilisant du réactif d'Armand (mélange acide + alcool + bleu de méthylène).
Cette coloration est utilisée prinipalement pour la mise en évidence de mycobactéries (apparaissent en rouge sur fond bleu)