- Couvrir la lame par dune solution d'acridine orange à 1% et laisser agir 15 minutes
- Rincer à l’eau
- Couvrir la lame avec la solution de décoloration et laisser agir 1 minute
- Rincer à l’eau
- Couvrir la lame de bleu de méthylène et laisser agir 1 minute
- Rincer à l’eau
- Couvrir la lame avec la solution de décoloration et laisser agir 3 minutes
- Rincer à l’eau
- Laisser sécher et lire au microscope à fluorescence (objectif 40)
C'est une alternative à la coloration de Ziehl-Neelsen pour la mise en évidence des mycobactéries. Elle permet d'augmenter la sensibilité de l'examen direct et permet un screening plus rapide. Un résultat positif à la coloration par l'acridine orange doit être confirmé par une coloration de Ziehl-Neelsen (qui peut être réalisé sur la même lame).